很多朋友对分光光度计具体是测什么,分光光度计原理介绍不是很了解,六月小编刚好整理了这方面的知识,今天就来带大家一探究竟。什么是分光
很多朋友对分光光度计具体是测什么,分光光度计原理介绍不是很了解,六月小编刚好整理了这方面的知识,今天就来带大家一探究竟。
什么是分光光度计?分光光度计是一种测量仪器,它用不连续的波长对反射或透射的物体进行采样。由于不同物体的分子结构不同,对不同波长的光的吸收能力也不同,所以每个物体都有特定的吸收光谱。能从各种波长的混合光中分离出每一种单色光,并测量其强度的仪器叫做分光光度计。
分光光度法是比色法的发展。比色法仅限于可见光,而分光光度法可以扩展到紫外光和红外光。分光光度法要求接近真单色光,光谱带宽不大于3-5 nm,紫外区可在1nm以下,来自棱镜或光栅,准确度高。分光光度计它是用分光光度法对物质进行定量和定性分析的仪器。
分光光度计可分为紫外分光光度计、可见分光光度计(或色度计)、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。
分光光度计已经成为现代分子生物学实验室的常规仪器。它通常用于核酸、蛋白质和细菌生长浓度的定量。该仪器主要由光源、单色仪、样品室、探测器、信号处理器和显示存储系统组成。分光光度计具有独特的双光束光学系统,分辨率更高,杂散光更低,稳定性和可靠性更强,分析更准确。
采用320*240位点阵高亮6”液晶,显示清晰,信息完整;独特的长光路设计使仪器的分辨率更高,尤其适用于微量测试强大的数据处理功能,使测试结果得到充分应用,用户编辑起来更加简单快捷;
设计了悬浮式光学系统,整个光路独立固定在16mm厚的铝基板上,不变形。底板变形和外界振动对光学系统没有影响,大大提高了仪器的稳定性和可靠性。采用同步正弦机构,波长精度高,重复性好;采用ARM系统;可自动选择0.1/0.2/0.5/1.0/2.0/4.0的光谱带宽,满足不同用户的测量需求;24位高速高精度A/D转换,仪器精度更高,响应速度更快;
主要元器件采用进口,使仪器杂散光更少,更稳定可靠;功能更加强大,主机可以独立完成光度测量、定量测量、光谱扫描、动力学、DNA/蛋白质测试、多波长测试、数据打印。
考虑到不同用户的使用习惯,该系列仪器标配颜渊公司的光谱扫描软件。在线运行时,不仅可以实现主机的所有测试功能,还可以实现更强大的数据处理功能,使数据存储量无限。
分光光度计原理分光光度计是利用一个可以产生多个波长的光源,通过一系列分光计,产生一个特定波长的光源。光线通过被测样品后,部分光线被吸收,计算出样品的吸收值,换算成样品的浓度。样品的吸光度与样品的浓度成正比。单色光辐射通过被测物质溶液时,被物质吸收的量与物质浓度和液层厚度(光程长度)成正比,关系如下:A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc。
其中:a为吸光度;I0是入射单色光的强度;I是透射的单色光强度;t是物质的透射比;k是摩尔吸收系数;l是分析物的光程,即比色皿的边长;c是物质的浓度;
光的选择性吸收波长和相应的吸收系数是材料的物理常数。当某一纯物质在一定条件下的吸收系数已知时,可以将样品在相同条件下配制成溶液,测定其吸收,这样就可以通过上式计算出样品中该物质的含量。在可见光区,除了一些吸收光的物质外,许多物质本身并不吸收光,而是在一定条件下加入显色剂或处理使其显色后才能测定,所以也叫比色分析。
由于影响显色深度的因素很多,且经常使用单色光纯度差的仪器,因此在测定时应同时使用标准品或对照品。
紫外分光光度计可以用来测量什么分光光度计是食品厂和饮用水厂QS和HACCP认证的必备检验设备。紫外吸收光谱分析主要用于已知物质的定量分析和纯度分析。1)测定溶液中物质的含量
测定标准溶液(已知浓度的溶液)和未知溶液(待测浓度的溶液)的吸光度,并进行比较,因为使用的吸收池厚度是一样的。还可以测量不同浓度的标准溶液的吸光度并绘制标准曲线,标准曲线在选定的浓度范围内应该是一条直线,然后测量未知溶液的吸光度,这样就可以从标准曲线中找到相应的浓度。2)用紫外光谱鉴定该化合物。
用不同波长的单色光通过一定浓度的溶液,测出该溶液对每种单色光的吸光度,然后以波长为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制吸光度-波长曲线,这就是吸收光谱曲线。每种物质都有自己的吸收光谱曲线,所以可以用吸收光谱曲线来鉴别物质的种类。紫外吸收光谱比较简单,同一物质的紫外吸收光谱应该是完整的。
分光光度计指示器型号UV-9000波长范围190-900nm;光谱带宽为0.1/0.2/0.5/1.0/2.0/4.0nm,精度为0.1 nm (D2 656.1 nm)和0.3nm;全区域波长重复性0.1nm .光度精度:0.2% t光度重复性:0.1% t托盘光:0.01% t稳定性:0.0004a/h(在500 nm处)基线平坦度:0.001A噪声级:0.0004a/h光度范围:0-200% t电源:AC 2200。
杂散光:0.5%(360nm处)波长精度:优于2 nm透过率精度: 1 nm分光光度计的用法(1)可见分光光度计是用来测量被测物质对可见光(400 ~ 760 nm)的吸光度并进行定量分析的仪器,称为可见分光光度计。可以在600纳米处测量细菌细胞密度。(2)紫外-可见分光光度计
紫外-可见分光光度计是用来测量被测物质对可见光或紫外光(200 ~ 760 nm)的吸光度并进行定量分析的仪器。可以确定核酸和蛋白质的浓度,也可以确定细菌细胞的密度。紫外分光光度计可分为单光束、假双光束和双光束。它们的用途又不一样了。
单光束:适用于测量给定波长的吸收率或透射率。一般不能进行全波段光谱扫描,对光源和探测器的稳定性要求很高。双光束:自动记录,快速全波段扫描。它可以消除光源不稳定和探测器灵敏度变化的影响,特别适用于结构分析。仪器复杂,价格高。
伪双光束,即比例双光束,其原理是将同一台单色仪发出的光分成两束,一束直接到达探测器,另一束通过样品后到达另一个探测器。这种仪器的优点是可以监测光源变化带来的误差,但不能消除参考带来的影响。(3)红外分光光度计
一般的红外光谱是指大于760nm的红外光谱,这是研究有机化合物最常用的光谱区,可以分析各种状态(气体、液体、固体)的样品。红外光谱法的特点是快速、样品量小(几微克到几毫克)、特性强(各种物质都有自己特定的红外光谱)、能分析各种状态(气体、液体和固体)的样品、对样品无损伤。(4)荧光分光光度计
荧光分光光度计是一种用于扫描液体荧光标记物发出的荧光光谱的仪器。用于科研、化工、医学、生物化学、环保、临床检验、食品检验、教学实验等领域。通过测量这些参数,不仅可以进行一般性的定量分析,还可以推断分子在各种环境下的构象变化,从而明确分子结构与功能的关系。(5)原子吸收分光光度计
本方法主要适用于分析样品中微量和痕量组分的常规仪器之一。它是材料分析和质量控制部门分析宏观和微观金属(半金属)元素的有力工具。分光光度计的注意事项(1)分光光度计应放在干燥的室内,使用时放在坚实稳定的工作台上。室内照明不宜过强。天气热的时候,不能用电风扇直接向仪器吹风,防止灯泡灯丝不稳定。
(2)使用分光光度计前,用户应先了解仪器的结构和工作原理以及各控制旋钮的功能。接通电源前,应检查仪器的安全性能,电源接线应牢固,供电应良好,各调节旋钮的起始位置应正确,然后打开电源开关。(3)分光光度计未接通电源时,电表指针必须在“0”线上。如果不是这样,可以用电表上的校正螺钉进行调整。
以上就是关于分光光度计具体是测什么,分光光度计原理介绍的知识,希望能够帮助到大家!
声明本站所有作品图文均由用户自行上传分享,仅供网友学习交流。若您的权利被侵害,请联系我们