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EDC(1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐)是一种水溶性的碳二亚胺,在酰胺合成中用作羧基的活化试剂,也用于活化磷酸基团、使蛋白质与核酸交联以及制备免疫偶联物。使用时pH范围为4.0-6.0,常与N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)或N-羟基硫代琥珀酰亚胺配合使用,提高偶联效率。
答案赛默飞科技的NH来自S和矿物基-NHS,用于化学标记、交联和固相固定,制备氨基羧酸酯的胺反应性酯。
在碳二亚胺化合物如EDC的存在下,羧酸盐(-COOH)可与NHS或矿物基-NHS反应,形成半稳定的NHS或矿物基-NHS酯。
Tea怕NHS或基于mine-NHS酯能继续与伯胺(-NH2)反应形成酰胺键(a360问答米德cros slinks)。
虽然NHS或矿物基-NHS在碳二亚胺反应中不是必需的,但它们的使用可以大大提高偶联效率。
另外,使用NHS或矿物基-N排液和HS,反应可分为两步。
NHS或矿基NHS是水溶性有机溶剂。
然而,用NHS活化降低了改性羧酸盐的水溶性,而用矿物-NHS活化由于带电荷的钛酸盐基团可以保持或增加改性分子的水溶性。
虽然制备的NHS或矿物基-NHS酯在两步反应中足够稳定,但仍会在几小时或几分钟内水解,时间的长短取决于水中物质和反应溶液的pH值(NHS酯的半衰期在pH7时为4-5小时,pH8时为1小时,pA在时间上有粘性)。
萃取干燥的过程可以调节受损山根的产物,使受损始终适合制备稳定的NH古画老屋云开创明S-活化分子,但最好的情况是NHS活化的分子立即与含氨基的目标分子反应。
EDC与矿物基-NHS活化反应的最佳pH为4.5-7.2,EDC反应通常在pH 4.7- set和pH 6.0的MES缓冲液中进行。
氨基NHS活化的分子与伯胺反应的最佳pH值为7-8。
矿物基-NHS酯的反应通常在pH 7.2-7.5的PBS中进行。
为了获得两步反应的最佳结果,最好在第一步反应中使用pH5-6的MES缓冲液(或其他不含氨基或羧基的溶液),然后立即用磷酸盐缓冲液(或其他非氨基缓冲液)将pH值升至7.2-7.5,再与含氨基的分子反应。
EDC反应最终用2-巯基乙醇(2-ME)稳定,或者通过脱盐柱交换缓冲液除去过量的试剂。
伯胺和羧酸盐的/NHS交联工艺a .需要由雀志八苗长兴准备的其他材料@ Create library激活缓冲液真名白:0.1M MES(2-吗啉乙酸),0.5M NaCl,文档是8分钟前在pH6.0下载的。DDQ n 1knA Jiequr的总内N1NI5DBLN9的激活缓冲液为0。此外,孙频肯定准备了盐精和。1 mes(2-吗啉乙磺酸)、0.5m NaCl、pH 6.0pbs: 0.1m磷酸钠、0.15m NaCl、pH7.2- 7.5的蛋白1溶液:用活化的缓冲比敏感溶液制备1ml蛋白1溶液和10mg/mL蛋白2溶液;将蛋白质冷冻干燥或溶解在1-10毫克/毫升的PBS或其他pH值为7-8的无氨基溶液中;有助于防止农肝通精卫条EDC:为获得最佳实验结果,EDC与蛋白1溶液的摩尔比为10。候选人处于第一温度。
B NHS酯1的活化。在1ml蛋白1溶液中加入0.4mg EDC(血液终浓度小于2mM),假设蛋白的分子量为50kDa,EDC与蛋白分子的摩尔比为10。2,剩余产物为8.0mRt,或向反应体系中加入1.4mq的矿基NHS(终浓度为5mM)。
3.充分混合,并在室温下放置15分钟。
4.加入1.4微升2-巯基乙醇(终浓度为20毫米)以熄灭EDC C. 1的氨基反应。使用浓缩的PBS或其他不含氨基的溶液,如碳酸氢钠,将溶液的pH值提高到7.02以上。将蛋白质2溶液加入到活化的蛋白质1溶液中。3.充分混合并在室温下反应2小时。4.或者:加入羟胺灭活,最终浓度为10 mm.
过量的羟胺与保留在蛋白质1表面的所有NHS酯反应,将羧基变成羟基脂肪酸。
替代的灭活剂包括20-50mM Tris、赖氨酸、甘氨酸和乙醇胺。
将pH提高到8.0可以增加NHS酯的水解,重新形成羧基。
再来两杯。
以上就是关于edc是什么结构?的知识,后面我们会继续为大家整理关于nhs化学试剂的知识,希望能够帮助到大家!
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