网上有很多关于为什么电泳使用琼脂糖而不用琼脂?的知识,也有很多人为大家解答关于琼脂糖的作用的问题,今天小编为大家整理了关于这方面的
网上有很多关于为什么电泳使用琼脂糖而不用琼脂?的知识,也有很多人为大家解答关于琼脂糖的作用的问题,今天小编为大家整理了关于这方面的知识,让我们一起来看下吧!
三、琼脂与琼脂糖
琼脂糖凝胶电泳与其他支持物电泳的主要区别在于它具有“分子筛”和“电泳”的双重功能。琼脂糖凝胶具有网状结构,直接参与带电粒子的分离过程。在电泳中,物质分子通过缝隙时会受到阻力,大分子在游动时会比小分子受到更大的阻力。所以在凝胶电泳中,带电粒子的分离不仅取决于净电荷的性质和数量,还取决于分子的大小,大大提高了分辨率。
琼脂糖由天然琼脂制成,天然琼脂是一种多糖,主要由琼脂糖(约80%)和琼脂凝胶组成。琼脂糖是由半乳糖及其衍生物组成的中性物质,不带电荷。琼脂凝胶是一种含有硫酸根和羧基的强酸性多糖。因为这些基团是带电的,所以在电场的作用下可以产生很强的电渗作用。因此,常被用于血清蛋白、血红蛋白、脂蛋白、糖蛋白、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶等同工酶的分离鉴定,为临床某些疾病的鉴别诊断提供了可靠的依据。免疫电泳技术与免疫化学反应相结合,用于抗原的分离和检测。可以对目前常用的琼脂糖进行一些改性,如引入化学基团羟乙基,可以使琼脂糖在65左右熔化,故称为低熔点琼脂糖。温度低于DNA的熔点,凝胶强度无明显变化。用这种支持物的电泳称为低熔点琼脂糖凝胶电泳,主要用于DNA研究。如DNA鉴定、DNA限制性内切酶图谱等。为DNA分子及其片段的分子量测定和DNA分子的构象分析提供了重要手段。
将琼脂糖凝胶电泳的优点总结如下:
1.琼脂糖凝胶电泳简单快速,样品无需预处理即可电泳。
2.琼脂糖凝胶结构均匀,含水量大(约98%~99%),类似自由电泳。样品以自由电流铺展,对样品的吸附很小,所以电泳图谱清晰,分辨率高,重复性好。
3.琼脂糖是透明的,没有紫外吸收,电泳过程和结果可以用紫外灯直接检测和定量测定。
4.电泳后区带易染色,样品易洗脱,便于定量测定。制备干膜可以长期保存。
琼脂糖凝胶电泳标记的作用是分子标记。DNA分子标记的优点是:大部分分子标记是共显性的,对于隐性性状的选择非常方便;基因组变异极其丰富,分子标记的数量几乎是无限的;在生物发育的不同阶段,不同组织的DNA可用于标记分析;分子标记揭示了DNA的变异;它是中性的,不影响目标性状的表达,与不健康症状没有连锁关系;该检测方法简单、快速。随着分子生物学技术的发展,DNA分子标记已有几十种,广泛应用于遗传育种、基因组作图、基因定位、物种亲缘关系鉴定、基因库构建、基因克隆等方面。
1\琼脂又名琼脂、白菜燕、冻干粉,是从花椰菜等红藻纲植物中提取的一种藻胆素,在中国和日本(1658年)已有300多年的历史。
2\琼脂糖,缩写为Ag,是琼脂中不带电荷的中性成分,也译为琼脂或琼脂糖。琼脂糖的化学结构由-D-吡喃半乳糖(1-4)连接到3,6-去饱和。
琼脂由琼脂糖和琼脂组成。琼脂糖作为胶凝剂,是一种不含硫酸盐(盐)的非离子多糖,是成胶成分,其大分子通过1,3-糖苷键与-D-吡喃半乳糖残基和3,6--L-吡喃半乳糖残基交替连接。琼脂果胶为非凝胶部分,是一种含有硫酸盐(盐)、葡萄糖醛酸和丙酮酸醛的复合多糖,也是商业提取中试图去除的部分。在工业上,琼脂的颜色从白色到微黄色,具有凝胶状的质地,无臭或略有特征性气味。琼脂不溶于冷水,溶于沸水
关于琼脂的使用,首先琼脂是没有营养的,也就是说普通的生物,甚至是微生物都不会分解它(虽然琼脂属于糖类)。因此,它常被用作生物培养基或药物载体。此外,它还广泛应用于食品工业。作为增稠剂和凝固剂,琼脂在90度左右融化,40度左右凝结成固体。加在经常吃的果冻、凉粉里,可以说是无害的。也可以使用悬浮剂、乳化剂、稳定剂和防腐剂。广泛用于制作颗粒橘子及各种饮料、果冻、冰淇淋、糕点、软糖、罐头、肉制品、八宝粥、银耳燕窝、汤类食品、冷食等。
以上就是关于为什么电泳使用琼脂糖而不用琼脂?的知识,后面我们会继续为大家整理关于琼脂糖的作用的知识,希望能够帮助到大家!
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